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關于布病抗體的檢測方法,哪種更合適您?

更新時間:2024-12-02   點擊次數:745次

布魯氏菌病(簡稱布病)嚴重危害畜牧養殖業安全和人類健康,而有效的檢測方法能夠為布病的預防、檢測和凈化提供技術支持。


布病檢測方法很多,包括膠體金試紙條檢測、酶聯免疫檢測方法、布病虎紅平板凝集試驗、試管凝集試驗、全乳環狀實驗等,在眾多檢測方法中,膠體金試紙條檢測法最為簡單方便,其檢測準確性如何?


布病抗體檢測卡檢測結果準確性如何?一起來關注——


布魯氏菌病抗體檢測方法有那些? 


01免疫膠體金檢測技術(GICA)


免疫膠體金檢測技術是基于抗原抗體檢測的一種新型免疫標記技術,在生物醫學的各領域得到了日益廣泛的應用。


膠體金法將布魯氏菌抗原固定在NC濾膜上,當待測樣本存在布魯氏菌病抗體時,血清抗體將會有固定在NC膜上的抗原結合形成復合物,在膠體金顆粒的加持下,會顯色出紅色條帶,進而判定樣本中是否存在抗體。GICA 具有高靈敏度、血清用量更少、適于現場操作、檢測樣品廣泛(部分GICA 產品檢測范圍可以涵蓋血清、全血、奶樣等不同樣品)等優勢。


02酶聯免疫吸附試驗(ELISA)

用于布病檢測的 ELISA 有兩種:

①間接 ELISA(i ELISA)

②競 爭 ELISA(c ELISA)


i ELISA是待檢血清樣本中的布魯氏菌抗體與 ELISA 板上固定的布魯氏菌抗原物質結合,利用酶標抗體檢測,然后通過底物顯色,最后用酶標儀來讀值。i ELISA 靈敏度較高,標記的抗體較少,成本更低,但是試驗周期更長。c ELISA 步驟較復雜,但可以檢測含有布魯氏菌抗體的不純凈血清,數據再現性更高,但是整體敏感性和特異性稍低。


ELISA 檢測布病的敏感性較高,用酶標儀判定試驗結果,避免了肉眼觀察判定結果的誤差,但對專業儀器要求較高,檢測試劑比較昂貴,增加了檢測成本,此外檢測過程中對環境溫度的要求也較高,因而限制了ELISA 的使用。


03虎紅平板凝集試驗(RBPT)


虎紅平板凝集試驗是一種經典的血清凝集試驗,靈敏度高、價格便宜、操作方便。但受試驗溫度和凝集時間相對較短的影響,不易準確判定 結果,而且受操作人員的主觀判斷影響比較大,故常作為篩選試驗,適用于具有專業知識背景的試驗人員用于高危動物篩查及流行病學的研究。


04試管凝集試驗(SAT)


試管凝集試驗是一種檢測血清中布魯氏菌抗體的方法。布魯氏菌抗原能夠與血清中的IgM抗體反應產生凝集現象,通過肉眼觀察試管中的凝集現象可做出結果判定。試管凝集試驗特異性較強,不易受其他干擾因子影響,陽性結果比較準確。


但試管凝集試驗也存在一定的不足,如每個血清樣本需要4支試管來實現4個梯度的試驗,在進行大批量樣本檢測時,需要大量的試管,試驗過程中還需要24h的孵育時間,不僅對耗材的需求量較大,且試驗時間也較長。


05全乳環狀試驗(MRT)


全乳環狀試驗主要通過檢測牛奶樣本中的抗體來實現布病檢測,且一般僅用于奶牛的布病檢測,不適用于其他品種家畜。如果待檢牛奶樣本中存在布魯氏菌抗體,就會與試驗用的紅色布魯氏菌抗原形成復合物,這些復合物會形成紫紅色的乳脂環,從而實現布病檢測。相比較于其他需要血清的檢測方法;


全乳環狀試驗具有一定的優勢,無論是單一奶牛的牛奶還是混合的大缸奶,都能實現布病檢測,無需采血,不會使奶牛因驅趕、保定、采血等行為產生應激反應,使奶牛產量不受影響,養殖戶更容易接受。


全乳環狀試驗的敏感性能夠滿足大型牛場布病的現場篩查,特異性較強,操作快捷而簡便,試劑成本不高,試驗結果可靠準確,全乳環狀試驗是一種能夠代替試管凝集試驗(SAT)的布病檢測方法。但是,如果牛奶樣本存放時間較長,或試驗溫度較高導致牛奶樣本腐敗,檢測結果就可能出現假陽性。當牛奶樣本中存在的初乳較多或者混合樣本量較大時,也有可能出現一定的假陽性結果。


布魯氏菌病作為人畜共患病,檢測的方法包括抗原檢測法和血清/全血抗體檢測法兩大類型。其中病原檢測需要在專業的P3實驗室或者專業的儀器配備相應人才檢測等條件限制了此種檢測方法的應用范圍,才導致了布魯氏菌病血清檢測法成為布魯氏菌病診斷的采用方法。


布病血清/全血抗體檢測的方法很多,膠體金法由于其操作便捷性和較高性價比,勢必逐步取代傳統虎紅平板法被用作現場布魯氏菌病的快速篩查的檢測產品。



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